Ukr.Biochem.J. 2021; Том 93, № 1, січень-лютий, c. 104-112

doi: https://doi.org/10.15407/ubj93.01.104

Застосування флуоресцентного кополімеру для підвищення ефективності зустрічного імуноелектрофорезу за діагностики інфекційних хвороб тварин

Д. Д. Остапів1, Н. В. Кузьміна1, М. Р. Козак1, Шань Ху2,
В. В. Влізло3*, І. Я. Коцюмбас3, С. М. Варваренко4,
В. Я. Самарик4, Н. Г. Носова4, М. В. Яковів4

1Інститут біології тварин НААН, Львів, Україна;
2Сільськогосподарський університет м. Циндао, КНР;
3Державний науково-дослідний контрольний інститут ветеринарних препаратів та кормових добавок, Львів, Україна;
4Національний університет «Львівська політехніка», Україна;
*e-mail: vasyl.vlizlo@scivp.lviv.ua

Отримано: 12 травня 2020; Затверджено: 17 грудня 2020

Метод зустрічного імуноелектрофорезу (ЗІЕФ) характеризується високою спе­фічністю, простотою і швидкістю проведення діагностичних досліджень без використання дорогого обладнання, витратних матеріалів та тривалого навчання персоналу. Попри високу інформативність (до 98–100%) результати застосування в експресдіагностиці можуть бути сумнівними. Тому метою досліджень було підвищити ефективність ЗІЕФ шляхом посилення взаємодії антигену з антитілом за використання синтезованого амфіфільного флуоресцеїновмісного кополімеру. Встановлено, що комплекс кополімер флуоресцеїн–антиген посилював взаємодію з антитілами сироватки/плазми крові імунізованих проти геморагічної хвороби кролів, що виявлялось у підвищенні вмісту протеїнів у зоні преципітації в разі проведення ЗІЕФ. Цей ефект був виразнішим за введення до складу комплексу з антигеном більш гідрофобного кополімеру, що містив 5,87% флуоресцеїну. Здатність амфіфільного флуоресцентного кополімеру посилювати взаємодію антиген-антитіло та можливість візуалізувати флуоресцентні зони преципітації можуть  підвищити ефективність ЗІЕФ як експрес-методу для виявлення антитіл за оцінки напруже­ності імунітету під час діагностики інфек­ційних хвороб­.

Ключові слова: , , ,


Посилання:

  1. Kornienko LE, Golovakha VI, Yarchuk BM, Golovko AM, Wild OV, Kornienko LM, Dombrovsky OB, Tirsin RV, Tirsina Yu.M. Parvovirus infections of dogs and fur animals. Bila Tserkva: Bila Tserkva National Agrarian University, 2001. 55 p. (In Ukrainian).
  2. Queiroz da Silva LH, Moreira Wildeberg C, Moura Wlamir C, Silva Marlon V. Demonstration of viral antibodies by the counterimmunoelectrophoresis Test. In book Current Laboratory Techniques in Rabies Diagnosis, Research and Prevention. Academic Press, 2015. 384 p.
  3. Silva LH, Bissoto CE, de Carvalho C,  Cardoso TC, Pinheiro DM, Perri SH. Comparison between the counter immunoelectrophoresis test and mouse neutralization test for the detection of antibodies against rabies virus in dog sera. Mem Inst Oswaldo Cruz. 2002;97(2):259-261. PubMed, CrossRef
  4. Ravinder PT, Parija SC. Countercurrent immunoelectrophoresis test for detection of hydatid antigen in the fluid from hydatid cysts: a preliminary report. Acta Trop. 1997;66(3):169-173. PubMed, CrossRef
  5. Raj GD, Thangavelu A, Elankumaran S, Koteeswaran A. Rocket immunoelectrophoresis in the diagnosis of infectious bursal disease. Trop Anim Health Prod. 2000;32(3):173-178. PubMed, CrossRef
  6. Imtiaz F, Akhtar M, Awai M, Muhammad F, Huma J. Standardization and Application of Modified Counter Immuno-Electrophoresis for the Detection of Antigenic Response against Haemonchus contortus in Rabbits. Pak J Life Soc Sci. 2011;9(1):13-16.
  7. Manzoor S, Rahman SU, Khan IA. Identification, and Titration of Hydro Pericardium Syndrome Virus (HPSV) by using Modified Counter-Current Immuno-Electrophoresis (MCCIE). J Antivir Antiretrovir. 2017;9(2):52-54. CrossRef
  8. Farid AH, Hussain I, Arju I. Detection of Aleutian mink disease virus DNA and antiviral antibodies in American mink (Neovison vison) 10 days postinoculation. J Vet Diagn Invest. 2015;27(3):287-294.  PubMed, CrossRef
  9. Kucheryavenko RO. Detection of bovine coronavirus antigen. Vet Med. 2009; 92: 266-270. (In Ukrainian).
  10. Chekh BO, Ferens MV, Ostapiv DD, Samaryk VY, Varvarenko SM, Vlizlo VV. Characteristics of novel polymer based on pseudo-polyamino acids GluLa-DPG-PEG600: Binding of albumin, biocompatibility, biodistribution and potential crossing the blood-brain barrier in rats. Ukr Biochem J. 2017;89(4):13-21.  CrossRef
  11. Varvarenko SM, Ferens MV, Samaryk VYa, Nosova NG, Fihurka NV, Ostapiv DD, Voronov SA. Synthesis of copolyesters of fluorescein and 2-(dodecanamino) pentanedionic acid via steglich reaction. Voprosy Khimii Khim Tekhnol. 2018;(2):5-15.
  12. Pat. 98749 UA, ICP(2006), C08G 77/46, C08G 63/66, C08G 63/12, C08G 63/685, C08G 63/668. A method of obtaining copolyesters of natural dibasic α-amino acids and glycol polyethers / Dron I.A., Taras R.S., Voronov S.A., Varvarenko S.M., Nagornyak M.I., Figurka N.V., Nosova N.G., Samaryk V. Ya., Voronov A.S., Ferens M.V., Tarnavchyk I.T. Publ. 12.05.2015, Bul. N 9. (In Ukrainian).
  13. Yakoviv MV, Nosova NG, Samaryk VY, Pasetto P, Varvarenko SM. Study of physical interactions of fluorescein-containing amphiphilic copolyesters with albumin in aqueous dispersions. Appl Nanosci. 2020;10(8):2655-2663.  CrossRef
  14. Tarnavchyk IT, Nosova NG, Panchenko AV, Maksymiv AB, Varvarenko SM. Sorption  of albumin on the surface of the dispersed phase сopolyestereters. Bull Nat Univ “Lviv Polytechnic”. Ser. Chem Technol Subst Appl. 2015;(812):465-470. (In Ukrainian).
  15. Kornienko LE, Glavatsky VP, Yarchuk BM, Kornienko LM,. Mandigra MS, Dombrovsky OB, Tirsin RV. Viral haemorrhagic disease of rabbits. Bila Tserkva: Bila Tserkva National Agrarian University, 2001. 60 p. (In Ukrainian).
  16. Yakoviv M, Fihurka N, Nosovа N, Samaryk V, Vasylyshyn T, Hermanovych S, Voronov S, Varvarenko S. Researches in amphiphilic properties of copolyesters with chromophore groups. Chem Chem Technol. 2018;12(3):318-325.  CrossRef
  17. Varvarenko SM, Samaryk VYa., Vlizlo VV, Ostapiv DD, Nosova NG, Tarnavchyk IT, Figurka NV, Ferens MV, Nagornyak MI, Taras RS, Yaremchuk IM, Voronov SA, Voronov AS. Fluorescein-containing theranostics based on the pseudo-poly(amino acid)s for monitoring of drug delivery and release. Polymer J. 2015;37(2):193-199. (In Ukrainian).

Creative CommonsThis work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.