Ukr.Biochem.J. 2021; Том 93, № 2, березень-квітень, c. 62-70

doi: https://doi.org/10.15407/ubj93.02.062

Тромбоеластографічне дослідження фібринового згустка та молекулярні основи максимальної щільності згустка

13.09.2021   Uncategorized   No comments

Д. С. Корольова1*, Є. М. Стогній1, В. І. Грищук1, С. І. Жук2,
І. В. Ус2, Т. М. Чернишенко1, О. П. Костюченко1, К. П. Клименко1,
О. М. Платонов1,3, O. I. Іващенко3, В. О. Чернишенко1

1Інститут біохімії ім. О. В. Палладіна НАН України, Київ;
2Національний університет охорони здоров’я України імені П. Л. Шупика, Київ, Україна;
3ННЦ «Інститут біології та медицини», Київський національний університет імені Тараса Шевченка, Україна;
*e-mail: d.korolova@gmail.com

Отримано: 29 січня 2021; Затверджено: 23 квітень 2021

Максимальна щільність згустка (MCF) основний параметр тромбоеластографії (TEG), який відображає стабільність згустка. Проведено пошук маркерів, які можуть впливати на збільшення MCF та визначено молекулярні маркери та параметри зсідання крові, задіяні у таких механізмах. Зразки крові вагітних жінок із плацентарною дисфункцією було відібрано в Перинатальному центрі міста Києва. TEG проведено на цільний крові в EXTEM та INTEM тестах. АЧТЧ, МНВ, концентрацію фібриногену та агрегацію тромбоцитів вимірювали за допомогою традиційних підходів лабораторної діагностики. D-димер визначали в сандвіч-імуноензимному аналізі з використанням моноклональних антитіл III-3B та II-4D. Відносну активність прошивки фактором XIIIa вимірювали шляхом прямого кількісного визначення прошитого γ-ланцюга фібрину методом Вестерн-блот із використанням моноклональних антитіл II-4D. Концентрації D-димеру та фібриногену, час зсідання за тестом АЧТЧ, МНВ та ступінь агрегації тромбоцитів не корелювали з MCF. Однак, ми виявили позитивну кореляцію MCF із активністю фактора XIIIa: 0,51 та 0,87 для EXTEM та INTEM відповідно. Одержані дані свідчать про те, що за нормальної чи дещо підвищеної концентрації фібриногену щільність фібринового згустка буде в основному залежати від активності фактора XIIIa. Таким чином, безпосереднє визначення активності фактора XIIIa в плазмі крові пацієнтів може бути важливим для прогнозування ризику внутрішньосудинного  зсідання. Оцінка вмісту та активності окремих факторів зсідання крові або інших компонентів системи зсідання може бути корисним доповненням до MCF діагностики, чим не слід нехтувати.

Ключові слова: , , , ,

Посилання:

  1. Othman M, Kaur H. Thromboelastography (TEG). Methods Mol Biol. 2017;1646:533-543.  PubMed, CrossRef
  2. Somani V, Amarapurkar D, Shah A. Thromboelastography for assessing the risk of bleeding in patients with cirrhosis-moving closer. J Clin Exp Hepatol. 2017;7(4):284-289. PubMed, PubMedCentral, CrossRef
  3. He Y, Xin X, Geng Y, Tang N, Zhou J, Li D. The value of thromboelastography for bleeding risk prediction in hematologic diseases. Am J Med Sci. 2016;352(5):502-506. PubMed, CrossRef
  4. Akay OM. The double hazard of bleeding and thrombosis in hemostasis from a clinical point of view: a global assessment by rotational thromboelastometry (ROTEM). Clin Appl Thromb Hemost. 2018;24(6):850-858. PubMed, PubMedCentral, CrossRef
  5. Kim SM, Kim SI, Yu G, Kim JS, Hong SI, Chae B, Shin YS, Kim YJ, Jang S, Kim WY. Role of Thromboelastography as an Early Predictor of Disseminated Intravascular Coagulation in Patients with Septic Shock. J Clin Med. 2020;9(12):3883. PubMed, PubMedCentral, CrossRef
  6. Wu S, Yuan H, Zhou Y, Long Z, Peng Y, Peng F. Thromboelastography-based assessment of coagulation function in patients with chronic kidney disease and the risk factors of hypercoagulability. Nan Fang Yi Ke Da Xue Xue Bao. 2020;40(4):556-561. (In Chinese). PubMed, PubMedCentral, CrossRef
  7. Raval JS, Burnett AE, Rollins-Raval MA, Griggs JR, Rosenbaum L, Nielsen ND, Harkins MS. Viscoelastic testing in COVID-19: a possible screening tool for severe disease? Transfusion. 2020;60(6):1131-1132. PubMed, PubMedCentral, CrossRef
  8. Pavoni V, Gianesello L, Pazzi M, Stera C, Meconi T, Frigieri FC. Evaluation of coagulation function by rotation thromboelastometry in critically ill patients with severe COVID-19 pneumonia. J Thromb Thrombolysis. 2020;50(2):281-286. PubMed, PubMedCentral, CrossRef
  9. Liu C, Guan Z, Xu Q, Zhao L, Song Y, Wang H. Relation of thromboelastography parameters to conventional coagulation tests used to evaluate the hypercoagulable state of aged fracture patients. Medicine (Baltimore). 2016;95(24):e3934. PubMed, PubMedCentral, CrossRef
  10. Chandrashekar A, Singh G, Garry J, Sikalas N, Labropoulos N. Mechanical and Biochemical Role of Fibrin Within a Venous Thrombus. Eur J Vasc Endovasc Surg. 2018;55(3):417-424. PubMed, CrossRef
  11. Xu S, Xu Z, Kim OV, Litvinov RI, Weisel JW, Alber M. Model predictions of deformation, embolization and permeability of partially obstructive blood clots under variable shear flow. J R Soc Interface. 2017;14(136):20170441. PubMed, PubMedCentral, CrossRef
  12. Lugovskoi EV, Kolesnikova IN, Komisarenko SV. Usage of monoclonal antibodies for determination of localization of antigenic determinants and fibrin polymerization sites within fibrinogen and fibrin molecules and their application in test–systems for diagnostics and the threat of thrombus formation. Biotechnologia Acta. 2013; 6(4): 33-42. CrossRef
  13. Platonova TN, Sushko OO, Colovjov DO, Iena IaM. Determination of fibrinogen content in human blood plasma using thrombin-like enzyme of ancistron N and analysis of hemostasis under presence of blood coagulation inhibitors. Fiziol Zh. 1993;39(1):15-19. (In Ukrainian). PubMed
  14. Sokolovska AS, Chernyshenko TM, Ivanenko TI. Comparative characteristic of fibrinogen level determination methods in blood plasma. Exp Clin Physiol Biochem. 2002; 3: 82-86. (In Ukrainian).
  15. Lugovskoi EV, Kolesnikova IN, Lugovskaia NE, Litvinova LM, Gritsenko PG, Gogolinskaia GK, Liashko ED, Kostiuchenko EP, Remizovskiy GA, Pedchenko VN, Komisarenko SV. Quantification of D-dimer and soluble fibrin in blood plasma of people with ischemic heart disease and hypertension. Ukr Biokhim Zhurn. 1999; 76(6): 136-141. (In Russian). PubMed
  16. Born GV. Aggregation of blood platelets by adenosine diphosphate and its reversal. Nature. 1962;194:927-929. PubMed, CrossRef
  17. He F. Laemmli-SDS-PAGE. Bio-101. 2011:e80.  CrossRef
  18. Wu HC, Yen CC, Tsui WH, Chen HM. A red line not to cross: evaluating the limitation and properness of gel image tuning procedures. Anal Biochem. 2010;396(1):42-50. PubMed, CrossRef
  19. Howie PW. Blood clotting and fibrinolysis in pregnancy. Postgrad Med J. 1979;55(643):362-366. PubMed, PubMedCentral, CrossRef
  20. Pat. 138359UA, ICP G 01 N33/00. The method of quantitative determination of enzymatic activity of bacterial Ca2+-independent transglutaminase  / Gryshchuk V.I., Stohnii  Y.M., Chernyshenko V.O., Chernyshenko T.M., Lugovska N.E. P. Publ. 14.05.2019, Bul. N 22. (In Ukrainian).
  21. Katona É, Pénzes K, Molnár É, Muszbek L. Measurement of factor XIII activity in plasma. Clin Chem Lab Med. 2012;50(7):1191-1202. PubMed, CrossRef
  22. Hellstern P, Schilz K, von Blohn G, Wenzel E. Determination of factor XIII activity and of factor XIII inhibitors using an ammonium-sensitive electrode. Thromb Haemost. 1983;50(2):563-566. PubMed, CrossRef
  23. Pabinger I, Grafenhofer H. Thrombosis during pregnancy: risk factors, diagnosis and treatment. Pathophysiol Haemost Thromb. 2002;32(5-6):322-324. PubMed, CrossRef
  24. Lykke JA, Bare LA, Olsen J, Lagier R, Arellano AR, Tong C, Paidas MJ, Langhoff-Roos J. Thrombophilias and adverse pregnancy outcomes: results from the Danish National Birth Cohort. J Thromb Haemost. 2012;10(7):1320-1325. PubMed, CrossRef
  25. Rodger MA. An update on thrombophilia and placenta mediated pregnancy complications: what should we tell our patients? Thromb Res. 2013;131(Suppl 1):S25-S27. PubMed, CrossRef
  26. Weisel JW, Litvinov RI. Fibrin Formation, Structure and Properties. Subcell Biochem. 2017;82:405-456. PubMed, PubMedCentral, CrossRef
  27. Lam WA, Chaudhuri O, Crow A, Webster KD, Li TD, Kita A, Huang J, Fletcher DA. Mechanics and contraction dynamics of single platelets and implications for clot stiffening. Nat Mater. 2011;10(1):61-66. PubMed, PubMedCentral, CrossRef
  28. Palta S, Saroa R, Palta A. Overview of the coagulation system. Indian J Anaesth. 2014;58(5):515-523. PubMed, PubMedCentral, CrossRef
  29. Lippi G, Cervellin G, Franchini M, Favaloro EJ. Biochemical markers for the diagnosis of venous thromboembolism: the past, present and future. J Thromb Thrombolysis. 2010;30(4):459-471. PubMed, CrossRef
  30. Peng HT, Nascimento B, Beckett A. Thromboelastography and thromboelastometry in assessment of fibrinogen deficiency and prediction for transfusion requirement: A descriptive review. Biomed Res Int. 2018;2018:7020539. PubMed, PubMedCentral, CrossRef
Creative CommonsThis work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.