Tag Archives: β-амілоїдні пептиди 40 і 42
Вплив куркуміну на накопичення в мононуклеарах і на секрецію в інкубаційне середовище Аβ(40) та цитокінів в умовах локального надлишку гомоагрегатів Аβ(42)
В. В. Соколік1, С. М. Шульга2
1ДУ «Інститут неврології, психіатрії і наркології НАМН України», Харків;
2ДУ «Інститут харчової біотехнології і геноміки НАН України», Київ;
e-mail: sokolik67@rambler.ru
Метою дослідження було вивчення накопичення в мононуклеарах і секреції до інкубаційного середовища ендогенного Аβ40 і цитокінів (IL-1β, TNFα, IL-6, IL-10) в умовах токсичного впливу Аβ42-агрегатів та антизапального ефекту куркуміну. Суспензію мононуклеарних клітин, ізольованих за допомогою фікол-урографінового градієнта зі зразків венозної крові здорових добровольців, використовували для дослідження впливу гомоагрегатів Аβ42 (15 нМ), куркуміну (54 пМ) та їх поєднаній дії в динаміці часу (0, 1, 2, 3, 6 і 24 год). Методом імуноензимного аналізу вимірювали вміст ендогенного Аβ40 і цитокінів окремо в мононуклеарах і в інкубаційному середовищі. Вперше показано, що гомоагрегати Аβ42 обумовлюють швидке накопичення ендогенного Аβ40 в мононуклеарах та прискорюють його секрецію до інкубаційного середовища. Встановлено збільшення концентрації TNFα (через 3 год інкубації) і відсутність накопичення IL-1β в клітинах завдяки істотній секреції цих запальних месенджерів до інкубаційного середовища. Виявлено збільшення мононуклеарного пулу IL-6 і активацію його секреції до інкубаційного середовища за дії Аβ42-гомоагрегатів. Аβ42 не впливав на секрецію IL-10, але обумовлював збільшення його внутрішньоклітинної концентрації через 1 год інкубації з наступним пригніченням клітинного накопичення. Додавання куркуміну запобігало збільшенню концентрації Аβ40 в мононуклеарах та вірогідно зменшувало його секрецію, обумовлену токсичним впливом екзогенного Аβ42 на клітини. Куркумін знімав активуючий ефект Аβ42 на мононуклеарний пул запальних цитокінів: з перших годин дії для IL-1β та в часовому інтервалі 3–6 год для TNFα, що позначилося зменшенням позаклітинного пулу обох цитокінів. Цей поліфенол також сприяв відновленню внутрішньоклітинного пулу IL-6 і IL-10 та позитивно впливав на їх секрецію до інкубаційного середовища.
Вплив β-амілоїдного пептиду 42 на динаміку експресії і утворення Аβ(40), IL-1β, TNFα, IL-6, IL-10 мононуклеарами периферійної крові in vitro та його корекція куркуміном
В. В. Соколік1, О. К. Коляда2, С. М. Шульга3
1ДУ «Інститут неврології, психіатрії і наркології НАМН України», Харків;
2ДУ «Інститут геронтології ім. Д. Ф. Чеботарьова НАМН України», Київ;
3ДУ «Інститут харчової біотехнології і геноміки НАН України», Київ;
e-mail: sokolik67@rambler.ru
Токсичний ефект Аβ-олігомерів супроводжує перебіг хронічного запального процесу, основними медіаторами якого є цитокіни. Тому цитокінова ланка запального процесу постає новою мішенню на шляху приборкання амілоїдозу. Метою дослідження був ефект агрегованого Аβ42 на динаміку експресії і утворення ендогенного Аβ40 і цитокінів (IL-1β, TNFα, IL-6, IL-10) мононуклеарами периферійної крові in vitro та його корекція куркуміном. Суспензію мононуклеарних клітин, ізольованих ex tempore за допомогою фікол-урографінового градієнта зі зразків венозної крові здорових добровольців, використовували для дослідження впливу Аβ42 (15 нМ), куркуміну (54 пМ) та їх поєднаної дії (за аналогічних концентрацій) в динаміці часу: 0, 1, 3, 6 і 24 год інкубації при температурі 37 °С. Методом полімеразної ланцюгової реакції визначали експресію генів АβРР, TNFα, IL-1β, IL-6 і IL-10 та імуноензимним аналізом встановлювали вміст Аβ40 і цитокінів у мононуклеарній суспензії в динаміці інкубації. Показали індивідуальну динаміку експресії АβРР і цитокінів за дії Аβ42, який впливав на вміст Аβ40, TNFα, IL-1β, IL-6 і IL-10 у мононуклеарній суспензії. Куркумін виявив інгібування експресії генів АβРР, TNFα і IL-6, що позначилося на зниженні рівня цих двох цитокінів і Аβ40. У роботі показано динаміку антизапального впливу куркуміну in vitro на транскрипційному і трансляційному рівнях утворення цитокінів мононуклеарами. Встановлено безпосередній пригнічувальний ефект куркуміну на концентрацію ендогенного Аβ40 протягом добової інкубації за умов токсичної дії агрегатів Аβ42.