Ukr.Biochem.J. 2014; Том 86, №4, липень-серпень, c. 103-109
doi: http://dx.doi.org/10.15407/ubj86.04.103
Проапоптичні властивості сумарного препарату фітогемаглютиніну та його окремих ізолектинів у культурі клітин людини 4BL
Т. О. Кочубей, О. В. Максимчук, Л. Л. Мацевич,
О. О. Півень, Л. Л. Лукаш
Інститут молекулярної біології та генетики НАН України, Київ;
е-mail: kochubei2009@ukr.net
Фітогемаглютинін (ФГА) – широко досліджуваний лектин, що має мітогенні властивості. За останніми експериментальними даними ФГА не лише індукує поділ клітин, а й має токсичну, або цитостатичну дію. Однак молекулярні механізми такого впливу залишаються недостатньо вивченими. Метою роботи було дослідити проапоптичні властивості сумарного препарату фітогемаглютиніну та його окремих ізолектинів у культурі клітин людини непухлинного походження 4BL. З використанням методу люмінесцентного забарвлення одержано дані, що вказували на ймовірну зміну частоти апоптичних клітин у досліджуваній культурі клітин за дії сумарного препарату фітогемаглютиніну та його окремого ізолектину – еритроаглютиніну. Із використанням методу Вестерн-блот аналізу було виявлено, що під впливом досліджуваних лектинів відбувається активація каспаз 3 та 8, а також індукція експресії проапоптозного протеїну Вах, при цьому найбільше підвищення вмісту активованих каспаз та протеїну Вах спричинює дія еритроаглютиніну. Порівняно з лейкоаглютиніном і сумарним препаратом фітогемаглютиніну еритроаглютинін найефективніше спричинює апоптоз, при цьому індукція апоптозу в культурі клітин людини непухлинного походження 4BL відбувається, ймовірно, як шляхом активації каспазозалежного, так і мітохондріального сигнальних шляхів.
Ключові слова: активована каспаза-3, активована каспаза-8, апоптоз, культура клітин 4BL, протеїн Вах, фітогемаглютинін та його ізолектини
Посилання:
- Piven’ OA, Lukash LL. Influence of exogeneous proteins on mutagenic process. Tsitol Genet. 2011 Jan-Feb;45(1):68-79. Review. Russian. PubMed
- Kovalenko OO, Lukash LL. Effect of lectins on induction of apoptosis in the populations of mammalian cells in vitro. Tsitol Genet. 2007 Sep-Oct;41(5):48-53. Ukrainian. PubMed
- Antonyuk V. O. Lectins and theirs sources of raw materials. Lviv: Kvart, 2005. 554 p. (In Ukrainian).
- Baintner K, Kiss P, Bardocz S, Pusztai A. Effect of orally administered plant lectins on intestinal liquor accumulation and amylase activity in rats. Acta Physiol Hung. 2004;91(1):73-81. PubMed, CrossRef
- Kuo WT, Ho YJ, Kuo SM, Lin FH, Tsai FJ, Chen YS, Dong GC, Yao CH. Induction of the mitochondria apoptosis pathway by phytohemagglutinin erythroagglutinating in human lung cancer cells. Ann Surg Oncol. 2011 Mar;18(3):848-56. PubMed, CrossRef
- Lis H, Sharon N. Lectins: Carbohydrate-Specific Proteins That Mediate Cellular Recognition. Chem Rev. 1998 Apr 2;98(2):637-674. PubMed, CrossRef
- Peumans WJ, Hao Q, Van Damme EJ. Ribosome-inactivating proteins from plants: more than RNA N-glycosidases? FASEB J. 2001 Jul;15(9):1493-506. Review. PubMed, CrossRef
- Lukash LL, Yatsyshyna AP, Kushnyruk VA, Pydpala OV. Changing of adult somatic cells in vitro. Proceedings of the International Conference “Factors Experimental evolution of organisms”. Alushta, September 2011. K.: Logos, 2011. P. 493–498.
- Lukash LL, Paton EB, Sukhorada EM, Ruban TA, Krupskaia IS, Kostetskaia EV, Bratsiuk SI. The evaluation of the cytotoxicity of preparations with anticarcinogenic effect in cultures of human cell. Tsitol Genet. 1997 Nov-Dec;31(6):26-34. Russian. PubMed
- McGanon AJ, Martin SJ, Bissonnette RP, Mahboubi A, Shi Y, Mogil RJ, Nishioka WK, Green DR. The end of the (cell) line: methods for the study of apoptosis in vitro. In book Methods in cell biology. Schwartz LM, Osborne BA, editors. Acad. Pres Inc “Cell Death”, 1995. P. 172–173.
- Maksymchuk OV, Bezdrobna LK, Sidorik LL, Kiseleva OK, Chaschyn MO. Cytochrome P450 2E1 expression in mice liver under exposure of continuous and acute γ-radiation. Ukr Biokhim Zhurn. 2008 Jul-Aug;80(4):59–65. (In Ukrainian). PubMed
- Laemmli UK. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. Nature. 1970 Aug 15;227(5259):680-5. PubMed, CrossRef
- Kоchubei ТO, Piven ОO, Аndrienko VI, Маcewicz LL, Karpova IS, Lukash LL. Influence of Phaseolus vulgaris phytohemagglutinin and its isoforms on the proliferation and survival of mammalian cells in vitro. The Bulletin of Vavilov Society of Geneticists and Breeders of Ukraine. 2012;10(1):42–50. (In Ukrainian).
- Wang D, Liang J, Zhang Y, Gui B, Wang F, Yi X, Sun L, Yao Z, Shang Y. Steroid receptor coactivator-interacting protein (SIP) inhibits caspase-independent apoptosis by preventing apoptosis-inducing factor (AIF) from being released from mitochondria. J Biol Chem. 2012 Apr 13;287(16):12612-21. PubMed, PubMedCentral, CrossRef
- Lima LR, Bezerra MF, Almeida SM., Silva LP, Beltrão EI, Carvalho Júnior LB. Glycophenotype evaluation in cutaneous tumors using lectins labeled with acridinium ester. Dis Markers. 2013;35(3):149-54. PubMed, PubMedCentral, CrossRef
- Eriksson D, Löfroth PO, Johansson L, Riklund K, Stigbrand T. Apoptotic signalling in HeLa Hep2 cells following 5 Gy of cobalt-60 gamma radiation. Anticancer Res. 2009 Nov;29(11):4361-6. PubMed
- Yamamoto H, Swoger J, Greene S, Saito T, Hurh J, Sweeley C, Leestma J, Mkrdichian E, Cerullo L, Nishikawa A, Ihara Y, Taniguchi N, Moskal JR. Beta1,6-N-acetylglucosamine-bearing N-glycans in human gliomas: implications for a role in regulating invasivity. Cancer Res. 2000 Jan 1;60(1):134-42. PubMed
