Tag Archives: еластаза
Змішанолігандні комплекси германію – 3d-металів з 1-гідроксиетан-1,1-дифосфоновою кислотою та 2,2′-біпіридином як модулятори еластазної та фібриногеназної активності Bacillus sp. IMV B-7883
О. В. Гудзенко1*, Л. Д. Варбанець1, І. Й. Сейфулліна2
О. Е. Марцинко2, К. К. Цимбалюк2,3
1Інститут мікробіології і вірусології ім. Д. К. Заболотного НАН України, Київ;
2Одеський національний університет імені І. І. Мечникова, Україна;
3ТОВ «Інспекторат Україна», Одеса;
*e-mail: alena.gudzenko81@gmail.com
Отримано: 07 листопада 2023; Виправлено: 11 грудня 2023;
Затверджено: 01 лютого 2024; Доступно онлайн: 26 лютого 2024
Раніше ми показали, що Bacillus sp. IMV B-7883 проявляє як еластазну, так і фібриногенолітичну активність. Одним із підходів до підвищення ензиматичної активності є використання координаційних сполук, здатних впливати на активність або синтез ензиму. Метою даної роботи було вивчення впливу різнолігандних комплексів Ge(IV) – Co(II), (Ni(II), Cu(II)) з 1-гідроксиетан-1,1-дифосфоновою кислотою та 2,2′-біпіридином на активність еластази та фібриногенази, очищеної з Bacillus sp. ІМВ B-7883. У дослідженні використовувалися раніше синтезовані та охарактеризовані змішанолігандні комплекси та ензими, очищені з супернатанту культуральної рідини бактерії. Активність еластази визначали колориметрично з використанням конго червоного, фібриногеназну активність оцінювали за гідролізом фібриногену. Показано, що комплекси 1 (C132H164Co4Ge6N24O68P12) і 2 (C132H148Ge6N24Ni4O60P12) пригнічують активність еластази Bacillus sp. IMV B-7883 на 54 і 71% відповідно, тоді як комплекс 3 (C92H128Cu4Ge6N16OO63P12) посилює її на 30%. Bиявлено стимулюючу дію всіх трьох комплексів на фібриногеназну активність. Так, комплекс 1 і 2 активували ензим більш ніж на 50%, а комплекс 3 – на 19%. Отримані дані свідчать щодо складного механізму впливу досліджуваних комплексів на ензиматичну активність залежно як від їх складу, так і від структури.
Виділення та характеристика протеаз Bacillus sp. IMB B-7883
О. В. Гудзенко*, Л. Д. Варбанець
Інститут мікробіології і вірусології ім. Д. К Заболотного НАН України, Київ;
*e-mail: alena.gudzenko81@gmail.com
Отримано: 20 липня 2023; Виправлено: 12 вересня 2023;
Затверджено: 27 жовтня 2023; Доступно онлайн: 06 листопада 2023
Представники Bacillus є одними з найкращих продуцентів протеаз, вивчених досі, оскільки вони виявляють широку субстратну специфічність, значну активність, стабільність, короткий період ферментації та низьку вартість. Раніше ми показали, що штам Bacillus sp. IMV B-7883 синтезує позаклітинні протеази, які виявляють еластолітичну та фібриногенолітичну активність. Метою роботи було виділення та очищення цих ензимів із культуральної рідини штаму-продуцента Bacillus sp. ІМВ В-7883, а також вивчити їх властивості. Виділення та очищення протеаз проводили осадженням культуральної рідини сульфатом амонію, гель-проникною та іонообмінною хроматографією та рехроматографією на Sepharose 6B. У результаті виділено протеази з еластолітичною та фібриногенолітичною активністю з молекулярною масою 23 та 20 кДа, відповідно, активність еластази зросла у 63,6 раза та фібриногенолітична активність – у 44,1 раза. Ензим з еластазною активністю мав рН-оптимум 7,0 і гідролізував лише еластин, тоді як ензим із фібриногенолітичною активністю був лужною протеазою з рН-оптимумом 8,0 і на додаток до фібриногену виявляв специфічність до фібрину та, у слідових кількостях, до колагену.