Л. О. Савінська¹, С. А. Квітченко^1,2, С. С. Пальчевський¹, І. В. Крупська¹,
А. В. Мазов¹, О. М. Гаріфулін¹, В. В. Філоненко¹*

¹Інститут молекулярної біології і генетики НАН України, Київ;
²ННЦ «Інститут біології та медицини»,
Київський національний університет імені Тараса Шевченка, Київ, Україна;
*e-mail: filonenko@imbg.org.ua

Отримано: 28 жовтня 2024; Виправлено: 05 листопада 2024;
Затверджено: 21 листопада 2024; Доступно онлайн: 17 грудня 2024

Наша початкова гіпотеза, що узгоджувалася з даними літератури, полягала в тому, що естрогеновий рецептор альфа (ESR1) може функціонувати як головний регулятор експресії генів, пов’язаних з епітеліально-мезенхімальним переходом (EMT) у ракових клітинах. Щоб дослідити це, ми використали систему редагування генів CRISPR/Cas9 для створення субліній MCF-7 із зниженою експресією ESR1 та проаналізували її вплив на ініціацію EMT в клітинах. Застосовуючи два різних типи gRNA для редагування гену, ми створили шість субліній MCF-7 клітин із майже повним або частковим зниженням вмісту ізоформ ESR1. Несподівано, нами не було виявлено помітного впливу зниження експресії ESR1 на прояв EMT, оскільки ні Вестерн-блот ні ПЛР аналіз в реальному часі обраних клонів не виявили змін у експресії маркерів EMT. Ми припустили, що ті ізоформи ESR1, на експресію яких не вплинуло редагування гена, можуть мати вирішальне значення в ініціації ЕМТ. Отримані моделі клітин будуть використані надалі для оцінки активності ізоформ ESR1.