В. А. Топтіков*, Є. А. Шестеренко, Ю. А. Шестеренко

Лабораторія медичної біотехнології та ензимології, відділ біомедицини,
Фізико-хімічний інститут імені О. В. Богатського НАН України, Одеса;
*e-mail: v.a.toptikov@gmail.com

Отримано: 02 липня 2025; Виправлено: 28 серпня 2025;
Затверджено: 28 листопада 2025; Доступно онлайн: 23 грудня 2025

Колагенази знайшли практичне застосування як у медицині, так і в харчовій промисловості, однак пошук нових джерел колагеназ залишається актуальним напрямом досліджень. Rapana, хижий молюск, що переважно живиться двостулковими, багатими на сполучну тканину, привертає увагу як потенційне джерело колагенолітичних ензимів. Метою цього дослідження було виділити препарат із колагеназною активністю зі слинних залоз Rapana venosa та охарактеризувати його властивості. Екстракт слинних залоз очищували методом осадження ацетоном із подальшою обробкою сульфатом амонію. Електрофорез здійснювали за протоколом Леммлі в умовах відновлення та без нього. Протеолітичну активність визначали спектрофотометрично з використанням колагену або желатину як субстрату. Показано, що препарат складався з п’яти протеїнових фракцій і проявляв ензиматичний поліморфізм. Було досягнуто очищення у 13,8 раза колагеназної активності, при цьому щонайменше 22% загальних протеїнів виявляли колагенолітичну активність, тоді як 88% – желатинолітичну. Оптимум активності препарату знаходився в кислому (pH 4,5) та лужному (pH ~ 9,5) діапазонах, а температурний оптимум становив 46°C. За кімнатної температури близько 90% активності зберігалося протягом 8 год. Інгібітори серинових протеаз не впливали на активність ензиму, тоді як хелатори іонів металів повністю її пригнічували. Відновлювальні агенти, що активують SH-групи, підвищували активність ензиму, тоді як регенерація дисульфідних зв’язків або модифікація SH-груп знижували її. Отримані дані свідчать, що колагеназно-активний ензимний препарат зі слинних залоз Rapana venosa переважно складається з металопротеїназ і цистеїнових протеаз та характеризується високою стабільністю.