Tag Archives: гладенькі м’язи ободової кишки

Вплив іонів важких металів, сперміну та нітропрусиду натрію на АТР-гідролази клітинних мембран гладеньких м’язів ободової кишки щура

О. А. Капля

Інститут біохімії ім. О. В. Палладіна НАН України, Київ;
e-mail: kaplya@biochem.kiev.ua

Досліджено особливості функціональної лабільності АТР-гідролаз клітинних мембран гладеньких м’язів ободової кишки (ГМОК). Показано, що Na+,K+-AТРаза ефективно інгібується двовалентними іонами як перехідних (≥ 0,1 мкМ), так і неперехідних (≥ 1 мкМ) важких металів у послідовності за ефективністю: Cu2+ > Fe2+ ≥ Cd2+ (10 мкМ). Поліамін спермін  (0,5–1,0 мМ) – слабкий інгібітор Na+,K+-AТРази ГМОК за насичуючих концентрацій іонів і субстрату. Донор оксиду азоту нітропрусид натрію (1 мМ) виявляв слабкий інгібувальний ефект на Na+,K+-AТРазу тільки за довготривалої попередньої інкубації з мембранами. Mg2+-АТРаза у всіх випадках була значно стійкішою до дії досліджуваних агентів. На прикладі Na+,K+-AТРази ГМОК припускається, що ензим характеризується біохімічними особливостями, які забезпечують можливість бути потенційною мішенню та редокс-сенсором, що опосередковує патофізіологічні механізми інтоксикації важкими металами та оксидативного ушкодження клітин.

Вплив іонів заліза на активність ATP-гідролаз клітинних мембран гладеньких м’язів ободової кишки та нирок щура

О. А. Капля

Інститут біохімії ім. О. В. Палладіна НАН України, Київ;
e-mail: kaplya@biochem.kiev.ua

З метою з’ясування особливостей структурної стійкості АТР-гідролаз у мембрані за дії прооксидантів: Fe2+ і пероксиду водню, а також N-етилмалеїміду (NEM) проведено порівняння Na+,K+-AТРазної активності гладеньких м’язів ободової кишки (ГМОК) з активністю відповідної Mg2+-АТР-гідролази і АТРаз мозкової речовини нирок щурів. Установлено, що за 0,1 мкМ концентрації FeSO4 активність Na+,K+-AТРази ГМОК знижується майже на 30%, а в діапазоні 0,1–10 мкМ – до 45% залишкової активності. За порівняння з ензимом нирок (виключно α1-ізоформа) чутливість Na+,K+-AТРази ГМОК до Fe2+ вірогідно вище за його субмікромолярної концентрації. Mg2+-АТРаза ГМОК значно резистентніша до дії іонів Fe2+, ніж ензим нирок, проте в обох випадках її чутливість значно нижче, ніж відповідної Na+,K+-AТРази. Na+,K+-AТРаза та Mg2+-АТРаза ГМОК і нирок однаково малочутливі до дії пероксиду водню за концентрацій до 1 мМ на тлі 1 мМ ЕГТА. Водночас у присутності 20 мкМ FeSO4 в діапазоні концентрацій Н2О2 1 нМ – 1 мМ Na+,K+-AТРаза інгібується значно більшою мірою, ніж Mg2+-АТРаза. Чутливість до NEM двох АТР-гідролазних систем ГМОК є відповідною до прооксидантної чутливості, що вказує на відмінності в значимості SН-груп для виявлення їхньої функціональної активності. Дійшли висновку, що Na+,K+-AТРаза може слугувати маркером чутливості мембран до окислення, а Mg2+-АТРаза (резистентна до окислення) може бути критерієм окисної резистентності мембранного ензимного комплексу за порівняння з іншими мембранними ензимами, особливо ензимами ГМОК.