І. К. Колос, О. Ф. Макарчиков

Гродненський державний аграрний університет,
Інститут біохімії біологічно активних сполук НАН Білорусі,
e-mail: a_makarchikov@yahoo.com

Ензими, які беруть участь у метаболізмі тіамінтрифосфату (ТТР) у тканинах птахів, дотепер не охарактеризовано. Метою цієї роботи було дослідити властивості тіамінтрифосфатази (ТТРази) печінки курей (Gallus gallus). Встановлено, що залежність швидкості гідролізу ТТР у гомогенаті печінки від рН має вигляд колоколоподібної кривої з максимумом рН 5,5–6,0. Катіони двовалентних металів (Mg²⁺, Ca²⁺) збільшують активність ТТРази в 17–20 разів, у присутності 5 мМ Mg²⁺ уявлена K_M ензиму для ТТР, розрахована методом нелінійної регресії та в координатах Гейнса, становить 1,7–2,2 мМ. Моновалентні аніони (I^–, SCN^–, NO₃^–, Br^–, Cl^–) у концентрації 150 мМ виявляють інгібуючу дію, знижуючи швидкість ТТРазной реакції на 20–60%. Після центрифугування гомогенату печінки більше 85% ТТРазної активності виявлялося в осаді, що свідчить про мембранну локалізацію ензиму. Обробка осаду 1%-им дез­оксихолатом натрію спричинює солюбілізацію мембран і виявлення в розчині 53% активності ТТРази. У разі хроматографії на колонці з тойо­перлом HW-55 ТТРаза елюювалася разом з аденозин- та інозинтрифосфатазою в об’ємі, що відповідає протеїнам із Мм 700 кДа. Одержані дані свідчать про те, що гідроліз ТТР у печінці курей відбувається мембраноасоційованим протеїновим комплексом, який виявляє широку субстратну специфічність.