Tag Archives: рекомбінантний протеїн
Вплив секреторної форми HB-EGF людини на клітини з різною кількістю та співвідношенням рецепторів EGFR і ErbB4
О. І. Криніна, Н. В. Короткевич, А. Ю. Лабинцев, С. І. Романюк, Д. В. Колибо, С. В. Комісаренко
Інститут біохімії ім. О. В. Палладіна НАН України, Київ;
e-mail: olyakrynina@gmail.com
Отримано: 18 липня 2019; Затверджено: 13 серпня 2019
HB-EGF є одним із найефективніших лігандів EGFR та ErbB4 рецепторів. Цей ростовий фактор відіграє важливу роль у багатьох клітинних процесах, проте його ефект відрізняється для різних типів клітин і залишається неповністю вивченим. Метою цієї роботи було дослідити залежність між HB-EGF-індукованою проліферацією клітин та активацією рецепторів EGFR і ErbB4. Для цього було проаналізовано вплив рекомбінантного аналога sHB-EGF людини (rsHB-EGF) на проліферацію клітин різних ліній, що мають різну кількість і співвідношення рецепторів EGFR і ErbB4, а також на активацію p38 та ERK1/2 (p42/44) кіназ МАРК-каскаду в цих клітинах. Для порівняння проведено аналогічні дослідження щодо впливу природного sHB-EGF, який виділявся клітинами гістоцитної лімфоми людини U937 за кокультивування з клітинами різних ліній. Встановлено, що інтенсивність проліферації клітин у відповідь на дію sHB-EGF залежить не тільки від кількості, а й від співвідношення рецепторів EGFR і ErbB4. Показано, що сигналінг через рецептор ErbB4 пов’язаний з активацією кінази p38, а сигналінг через рецептор EGFR – з активацією кінази ERK1/2 (p42/44). Зроблено припущення про існування двох різних механізмів стимулювання проліферації клітин під впливом sHB-EGF, одночасний запуск яких обумовлює максимальну проліферативну відповідь клітин. Результати цього дослідження свідчать на користь доцільності створення антипроліферативних препаратів, націлених на рецептор ErbB4.
Специфічність та чутливість нового тесту для серологічної діагностики туберкульозу на основі злитого антигену MPT83-MPT63
А. А. Сіромолот1,2, Т. О. Чудіна2, I. C. Данілова3,
О. М. Рекалова4, Д. В. Колибо1,2, С. В. Комісаренко2
1ННЦ «Інститут біології та медицини», Київський національний університет імені Тараса Шевченка, Україна;
2Інститут біохімії ім. О. В. Палладіна НАН України, Київ;
3ННЦ «Інститут експериментальної та клінічної ветеринарної медицини», Харків, Україна;
4ДУ «Національний інститут фтизіатрії і пульмонології ім. Ф. Г. Яновського НАМН України», Київ;
e-mail: saa0205@ukr.net
Метою цієї роботи було провести порівняльну характеристику експериментальної тест-системи з використанням злитого протеїну MPT83-MPT63 з референсними комерційними діагностикумами та дослідити основні оцінювальні характеристики імуноензимних тестів, таких як специфічність та чутливість. Крім того, ми намагалися дослідити кореляційну залежність біохімічних та імунологічних показників зразків крові пацієнтів із ТБ та тест-системами, які правильно діагностували захворювання у цих пацієнтів. Показано, що запропонована нами експериментальна тест-система не поступається існуючим діагностичним серологічним тестам щодо критеріїв вірогідності, інформативності та основним вимогам використання подібних імуноензимних тестів. Розроблено інструкцію щодо тестування зразків сироваток та показання до використання серологічних методів діагностики, що пропонуються.
Вивчення амінотрансфераз томата Solanum lycopersicum, задіяних у біосинтезі амінокислот із розгалуженим ланцюгом
А. С. Кочевенко1,2, А. Р. Ферні2
1Iнститут клітинної біології та генетичної інженерії НАН України, Київ;
2Макс-Планк-Інститут молекулярної фізіології рослин, Гольм, Німеччина;
e-mail: andkochevenko@gmail.com
У дослідженні наведені дані щодо ролі протеїнів томата Solanum lycopersicum ВСАТ3 і ВСАТ4 у біосинтетичному шляху амінокислот із розгалуженим ланцюгом. Шляхом аналізу ПДРФ (поліморфізму домену рестрикційних фрагментів) проведено картування генів ВСАТ3 та ВСАТ4. За допомогою скануючої мікроскопії продемонстровано, що GFP-мічені протеїни, які кодуються цими генами, локалізовані у хлоропластах. Встановлено, що дві ізоформи амінотрансфераз демонструють різні кінетичні характеристики та відрізняються за рівнем експресії їхніх мРНК у різних типах тканин томата.