Ukr.Biochem.J. 2016; Том 88, № 6, листопад-грудень, c. 63-69

doi: https://doi.org/10.15407/ubj88.06.063

Характеристика антитіл мишей, імунізованих неконвенційним міозином людини

С. Л. Мироновський1, Н. М. Бойко1, В. В. Чумак1, М. С. Шоробура2,
М. Д. Луцик1, Р. С. Стойка1, Ю. Я. Кіт1*

1Інститут біології клітини НАН України, Львів;
e-mail: kit@cellbiol.lviv.ua;
2Львівський національний університет імені Данила Галицького, Україна

Антитіла, що виробляються імунізацією протеїном, є безцінними інструментами для моніторингу його структури, внутрішньоклітинної локалізації та біологічної активності. Для імунізації мишей необхідна невелика кількість антигену, але низький вихід антитіл недостатній для їх подальшого застосування. Перевивка клітин лімфоми в черевну порожнину імунізованих мишей забезпечує генерацію асцитичної рідини, що містить значну кількість антитіл необхідної антигенної специфічності. У роботі показано, що внутрішньочеревинне введення клітин мишачої лімфоми NK/Ly мишам, імунізованим ізоформою неконвенційного міозину 1с 48 кДа  (48/Myo1c), яка виділена із сироватки крові людини, призводила до утворення в асцитичній рідині специфічних IgG-антитіл. Встановлено, що одержані антитіла здатні зв’язувати 48/Myo1c, виділений із сироватки крові хворих розсіяним склерозом або ревматоїдним артритом, системним червоним вовчаком, і можуть бути використані для діагностики автоімунних захворювань, зокрема розсіяного склерозу.

Ключові слова: , ,


Посилання:

  1. Sleister HM, Rao AG. Subtractive immunization: a tool for the generation of discriminatory antibodies to proteins of similar sequence. J Immunol Methods. 2002 Mar 1;261(1-2):213-20. PubMed, CrossRef
  2. Lieberman R, Douglas JO, Mantel N. Production in mice of ascitic fluid containing antibodies induced by Staphylococcus- or Salmonella-adjuvant mixtures. J Immunol. 1960 May;84:514-29. PubMed
  3. Myronovkij S, Negrych N, Nehrych N, Redowicz MJ, Souchelnytskyi S, Stoika R, Kit Y. Identification of a 48kDa form of unconventional myosin 1c in blood serum of patients with autoimmune diseases. Biochem Biophys Reports. 2016; 5: 175-179. CrossRef
  4. Kit Yu, Korniy N, Kril’ I, Magorivska I, Tkachenko V, Bilyy R, Stoika R. Proteolytic activity of IgG-antibodies of mice, immunized by calf thymus histones. Ukr Biochem J. 2014 Mar-Apr;86(2):79-88.(In Ukrainian).  PubMed, CrossRef
  5. Laemmli UK. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. Nature. 1970 Aug 15;227(5259):680-5. PubMed, CrossRef
  6. Magorivska IB, Bilyy RO, Havrylyuk AM, Chop’yak VV, Stoika RS, Kit YY. Anti-histone H1 IgGs from blood serum of systemic lupus erythematosus patients are capable of hydrolyzing histone H1 and myelin basic protein. J Mol Recognit. 2010 Sep-Oct;23(5):495-502.  PubMedCrossRef
  7. Adkins JN, Varnum SM, Auberry KJ, Moore RJ, Angell NH, Smith RD, Springer DL, Pounds JG. Toward a human blood serum proteome: analysis by multidimensional separation coupled with mass spectrometry. Mol Cell Proteomics. 2002 Dec;1(12):947-55. PubMed, CrossRef
  8. Schrader M, Schulz-Knappe P. Peptidomics technologies for human body fluids. Trends Biotechnol. 2001 Oct;19(10 Suppl):S55-60. Review. PubMed, CrossRef
  9. Wrotnowski C. The future of plasma proteins. Genet Eng News. 1998;18:14-18.
  10. Bond LM, Brandstaetter H, Kendrick-Jones J, Buss F. Functional roles for myosin 1c in cellular signaling pathways. Cell Signal. 2013 Jan;25(1):229-35. Review. PubMed, PubMedCentral, CrossRef
  11. Fuchs TA, Abed U, Goosmann C, Hurwitz R, Schulze I, Wahn V, Weinrauch Y, Brinkmann V, Zychlinsky A. Novel cell death program leads to neutrophil extracellular traps. J Cell Biol. 2007 Jan 15;176(2):231-41. PubMed, PubMedCentral, CrossRef
  12. Maravillas-Montero JL, Gillespie PG, Patiño-López G, Shaw S, Santos-Argumedo L. Myosin 1c participates in B cell cytoskeleton rearrangements, is recruited to the immunologic synapse, and contributes to antigen presentation. J Immunol. 2011 Sep 15;187(6):3053-63.  PubMed, CrossRef

Creative CommonsThis work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.