Ukr.Biochem.J. 2016; Том 88, № 6, листопад-грудень, c. 26-34
doi: https://doi.org/10.15407/ubj88.06.026
Очистка та властивості ліпоксигенази із проростків пшениці, інфікованих Fusarium graminearum та оброблених саліциловою кислотою
О. О. Молодченкова1, В. Г. Адамовська1, Л. Й. Цисельська1,
Л. Я. Безкровна1, Т. В. Картузова1, В. Б. Яблонська2
1Селекційно-генетичний інститут–Національний центр насіннєзнавства та сортовивчення, Україна;
e-mail: olgamolod@ukr.net;
2Одеський національний медичний університет, Україна;
e-mail: 93vi_63@mail.ru
Ліпоксигеназа виділена із проростків пшениці, вирощених у нормальних умовах, інфікованих збудниками фузаріоза та оброблених саліциловою кислотою. Виділений ензим був очищений з використанням методів висолювання 60%-им сульфатом амонію, діалізу, гель-фільтрації та іонообмінної хроматографії. Питома активність виділеної ліпоксигенази – 8,0–12,5 ΔЕ234/мг протеїну, ступінь очистки – 11,6–15,3 раза, вихід ензиму – 18,3–27,9%. Молекулярна маса ліпоксигенази – 90 кДа, амінокислотний склад відрізнявся підвищеним вмістом глутамінової кислоти, проліну, валіну, ізолейцину, лейцину та низьким вмістом гістидину, тирозину, фенілаланіну, треоніну, триптофану, цистеїну. Під час дослідження субстратної залежності активності ліпоксигенази в реакції переокислення лінолевої, ліноленової та арахідонової кислот встановлено ефект інтенсивнішого окислення арахідонової кислоти при концентрації субстрату 4,5 мМ (рН 7,2), лінолевої кислоти при концентрації субстрату 4,5 мМ (рН 7,2) та ліноленової кислоти при концентрації субстрату 9,0 мМ (рН 8,0). Показана зміна активності ліпоксигенази, виділеної із проростків генотипів пшениці, які відрізняються за стійкістю до фузаріозу, залежно від стійкості генотипу до патогену та середовища пророщування. Одним із проявів захисної дії саліцилової кислоти є її здатність індукувати зміну активності ліпоксигенази.
Ключові слова: Triticum aestivum L., ліпоксигеназа, саліцилова кислота, фузаріоз
Посилання:
- Tarchevsky IA. Biogeneous stress in the plants. М.: Science, 2002. 294 p.
- Iliynskaya LI, Vasyukova NI, Ozeretskovskaya OL. Biochemical aspects of induced plant resistance and susceptibility. М.: VINITI, 1991. P. 4-71.
- Siedow JN. Plant lipoxygenase: structure and function. Annu Rev Plant Physiol Plant Mol Biol. 1991;42:145-158. CrossRef
- Porta H, Rocha-Sosa M. Plant lipoxygenases. Physiological and molecular features. Plant Physiol. 2002 Sep;130(1):15-21. PubMed, PubMedCentral, CrossRef
- Rudolph M, Schlereth A, Körner M, Feussner K, Berndt E, Melzer M, Hornung E, Feussner I. The lipoxygenase-dependent oxygenation of lipid body membranes is promoted by a patatin-type phospholipase in cucumber cotyledons. J Exp Bot. 2011 Jan;62(2):749-60. PubMed, PubMedCentral, CrossRef
- Vidhyasekaran P. Plant hormone signaling systems in plant innate immunity. Dordrecht:Springer, 2015. 200 p.
- Оsterman LА. Chromatography of proteins and nucleic acids. М.: Science, 1985. 535 p.
- Kochetov GA. A practical manual to enzymology. M.: Vysshaya shkola, 1980. 271 p.
- Dubtsov GG, Popov МP. Меthod of wheat lipoxygenase determination. Prikl Biokhim Mikrobiol. 1970;6(4):471-475.
- Lowry OH, Rosebrough NJ, Farr AL, Randall RJ. Protein measurement with the Folin phenol reagent. J Biol Chem. 1951 Nov;193(1):265-75. PubMed
- Borisova IG, Gordeeva NТ, Budnytskaya ЕV. Comparative research of molecular forms composition of plant lipoxygenases. Dokl Akad Nauk SSSR. 1981;261(5):1260-1263.
- Chen G, Hackett R, Walker D, Taylor A, Lin Z, Grierson D. Identification of a specific isoform of tomato lipoxygenase (TomloxC) involved in the generation of fatty acid-derived flavor compounds. Plant Physiol. 2004 Sep;136(1):2641-51. PubMed, PubMedCentral, CrossRef
- Hale SA, Richardson T, von Elbe JH, Hagedorn DJ. Lipids 4. 1969:209-215.
- Shiiba K, Negishi Y, Okada K, Nagao S. Purification and characterization of lipoxygenase isoformes from wheat germ. Cereal Chem. 1991;68(2):115-122.
- Аdamovskaya VG, Klechkovskaya ЕА, Моlodchenkova ОО, Vovchuck SV. The change of proteinase-inhibitor system of winter wheat at the action of salicylic acid and Fusarium. Plant Physiology. 2000;47(2):210-215.
This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.







