O. Платонов¹*, В. Нікуліна¹, Є. Кучерявий¹, В. Грищук¹,
Є. Стогній¹, В. Черенишенко¹, O. Сломінський¹,
A. Ребрієв^1, K. Савченко^1,2, Л. Гарманчук²

¹Інститут біохімії ім. О. В. Палладіна НАН України, Київ;
²ННЦ “Інститут біології та медицини”,
Київський національний університет імені Тараса Шевченка, Україна;
*e-mail: chaosplaton@gmail.com

Отримано: 28 січня 2022; Виправлено: 03 жовтня 2022;
Затверджено: 20 вересня 2022; Доступно онлайн: 19 грудня 2022

Дезінтегрини – антагоністи інтегринових рецепторів, які отримують з отрути змій. Вони інгібують агрегацію тромбоцитів, тим самим перешкоджаючи формуванню кров’яного згустку. Відомо, що дезінтегрини, блокуючи інтегрин-опосередковані взаємодії пухлинних клітин, можуть пригнічувати їхню проліферацію та метастазування. Отже, пошук нових джерел дезінтегринів та розробка методів їх очистки є важливим завданням сучaсної біотехнології. Цю роботу присвячено очистці та характеристиці дезінтегринів отрути Bitis arietans. Цільну отруту B. аrietans фракціонували методом іонообмінної хроматографії на Q Sepharose з наступною очисткою гель-фільтрацією на Superdex 75, використовуючи FPLC. Аналіз молекулярної маси протеїнових компонентів виконаний методами гель-електрофорезу та MALDI-TOF аналізу на Voyager-DE (Applied Biosystems, США). Агрегацію збагаченої тромбоцитами плазми крові (ЗТПК) за присутності інгібітора агрегації тромбоцитів проводили методом агрегатометрії на AR2110. MTT-тест було виконано для оцінки проліферативної активності та життєздатності клітин лінії HeLa in vitro. Двоетапна хроматографія дозволила нам отримати фракції, які містять поліпептид із дозозалежною інгібіторною дією на ADP-індуковану агрегацію тромбоцитів у ЗТПК. Гель-електрофорез показав, що отримана фракція містить 2 поліпептиди з молекулярною масою 9,0 та 13,67 кДа відповідно до результатів MALDI-TOF аналізу. Очищені поліпептиди інгібували АDP-індуковану агрегацію тромбоцитів (IC₅₀ = 0,09 мг/мл). Відповідно до результатів МТТ-тесту, фракція дезінтегринів (0,005 мг/мл) пригнічувала життєздатність пухлинних клітин лінії HeLa на 20%. Зроблено висновок про можливість використання отриманих поліпептидів як антитромботичних та антипроліферативних агентів.