Tag Archives: ревматоїдний артрит
Виділення, характеристика та антиоксидантна активність фібриноген-подібного протеїну-1 із сироватки та синовіальної рідини пацієнтів із ревматоїдним артритом
Abdulsattar J. Abdullah, Zahraa M. A. Hamodat*
Department of Chemistry, College of Science, University of Mosul, Iraq;
*e-mail: zahraahamodat@uomosul.edu.iq
Отримано: 20 квітня 2025; Виправлено: 01 червня 2025;
Затверджено: 11 червня 2025; Доступно онлайн: 07 липня 2025
Ревматоїдний артрит (РА) – це автоімунне захворювання, що характеризується хронічним запаленням і окислювальним стресом. Фібриноген-подібний протеїн-1 (FGL1) залучений у регуляції імунітету, але його антиоксидантна роль у разі запалення залишається недостатньо вивченою. Метою цього дослідження було виділення, очищення та оцінка антиоксидантної активності FGL1 із сироватки крові здорових людей, а також із сироватки та синовіальної рідини пацієнтів із РА. Очищення включало осадження сульфатом амонію (65%), діаліз, гель-фільтраційну хроматографію (Sephadex G-75), SDS-PAGE і HPLC. Антиоксидантну активність оцінювали за допомогою поглинання радикалів DPPH і розрахунком значення IC50. Аналіз SDS-PAGE і HPLC підтвердив успішне виділення, ідентичність і високу чистоту FGL1 з усіх зразків. Молекулярна маса протеїну варіювала від 68 до 70 кДа. DPPH-аналіз показав, що FGL1, виділений із синовіальної рідини хворих на РА, мав найвищу антиоксидантну активність (IC50 = 2,124 нг/мл), у сироватці хворих на РА значення IC50 = 2,172 нг/мл і у контрольній групі – IC50 = 2,798 нг/мл. Ці результати вказують на подвійну роль протеїну FGL1 в імунній відповіді та окислювальному балансі, що робить його перспективним біомаркером і потенційною терапевтичною мішенню при ревматоїдному артриті.
Характеристика Ca(2+), Mg(2+)-АТР-аз лімфоцитів периферичної крові хворих з ревматичною патологією
Р. В. Фафула, У. П. Єфремова, З. Д. Воробець
Львівський національний медичний університет імені Данила Галицького, Україна;
e-mail: roman_fafula@ukr.net, vorobets@meduniv.lviv.ua
Проведено аналіз кінетичних властивостей Сa2+, Mg2+-ATР-ази сапонін-перфорованих лімфоцитів периферичної крові здорових донорів і хворих на ревматоїдний артрит та анкілозивний спондилоартрит. За оцінкою змін гідролазної активності Сa2+, Mg2+-ATР-ази встановлено, що спорідненість Сa2+, Mg2+-ATР-ази плазматичної мембрани і мембран ендоплазматичного ретикулума до АТР вірогідно не відрізняється. В умовах розвитку ревматичної патології інгібування активності досліджуваних ензиматичних систем в імунокомпетентних клітинах відбувається за змішаним типом – як за рахунок зменшення числа обертів ензиму, так і за рахунок зниження спорідненості Са2+-ATР-аз до субстрату. Доведено, що в лімфоцитах осіб з ревматичною патологією Сa2+, Mg2+-ATР-аза вірогідно характеризується нижчою спорідненістю до субстрату транспортування, ніж у здорових донорів.
Кінетичні властивості Na(+), K(+)-АТР-ази лімфоцитів крові у хворих на ревматоїдний артрит та анкілозивний спондилоартрит
Р. В. Фафула, У. П. Єфремова, Н. Е. Личковська, З. Д. Воробець
Львівський національний медичний університет імені Данила Галицького, Україна;
е-mail: roman_fafula@ukr.net, vorobets@meduniv.lviv.ua
Проведено аналіз кінетичних властивостей уабаїнчутливої Na+, K+-ATР-ази сапонін-перфорованих лімфоцитів периферичної крові донорів та хворих на ревматоїдний артрит (РА) та анкілозивний спондилоартрит (АСА). За оцінкою змін гідролазної активності Na+, K+-ATР-ази встановлено, що у лімфоцитах крові хворих на РА і АСА первинноактивне транспортування іонів Na+ та K+ відбувається менш інтенсивно у порівнянні з донорами, але має з ними майже однакову ємність. Константа спорідненості Na+, K+-ATР-ази до АТР у лімфоцитах крові хворих на РА і АСА перевищує її значення порівняно з донорами у 3,1 і 2,5 раза відповідно. Показано, що в умовах розвитку ревматичної патології в імунокомпетентних клітинах інгібування активності Na+, K+-ATР-ази відбувається не за рахунок зменшення числа обертів ензиму, а за рахунок зниження спорідненості уабаїнчутливої Na+, K+-ATР-ази до АТР. Водночас, Mg2+-зв’язувальна ділянка уабаїнчутливої Na+, K+-ATР-ази лімфоцитів крові хворих на РА і АСА залишається нативною. Відзначено також, що константа спорідненості Na+, K+-ATР-ази лімфоцитів крові хворих на РА і АСА до іонів Na+ у 2,75 раза нижча її величини у донорів. Досліджено, що Na+, K+-ATР-аза лімфоцитів крові хворих на РА і АСА зберігає свої нативні рецепторні властивості, а її чутливість до інгібування уабаїном не змінюється.
Протеолітична активність IgG сироватки крові щурів лінії Wistar за експериментального ревматоїдного артриту
Ю. Я. Кіт1, С. Л. Мироновський3, І. Й. Кріль2,
А. М. Гаврилюк2, В. В. Чоп’як2, Р. С. Стойка1
1Інститут біології клітини НАН України, Львів;
2Львівський національний медичний університет імені Данила Галицького, Україна;
3Львівський національний університет імені Івана Франка, Україна;
e-mail: kit@cellbiol.lviv.ua
Метою роботи було дослідити протеолітичну активність IgG сироватки крові щурів лінії Wistar за експериментального ревматоїдного артриту (ЕРА), індукованого колагеном бика II типу. Для цього 20 щурів імунізували препаратом колагену бика II типу (Sigma Aldrich, США) у присутності ад’юванта Фрейнда. Розвиток ЕРА визначали за запаленням кінцівок у піддослідних тварин. Препарати IgG виділяли із сироватки крові імунізованих і неімунізованих тварин, осадженням антитіл 33%-им розчином сульфату амонію з наступною хроматографією на протеїн-G-сефарозній колонці. Як субстрати протеолітичної активності антитіл використовували: колаген бика II типу, гістони тимуса теляти, основний протеїн мієліну (ОПМ), БСА, коров’ячий казеїн. Встановлено, що препарати IgG сироватки крові щурів із ЕРА здатні гідролізувати гістон Н1, ОПМ, але каталітично неактивні щодо колагену II типу, казеїну, БСА та корових гістонів. IgG сироватки крові неімунізованих щурів не виявляли протеолітичну активність до жодного із цих протеїнових субстратів. Одержані нами дані вказують на те, що за колагеніндукованого артриту у сироватці крові щурів з’являються IgG-антитіла, які виявляють протеолітичну активність щодо гістону Н1 і ОПМ, що може бути пов’язано із розвитком запальних процесів в імунізованих щурів.