Tag Archives: фулерен С(60)

Активація ємнісного входу Ca(2+) в резистентних до цисплатину лейкемічних клітинах за дії фотозбудженого фулерену С(60) та цисплатину

Д. В. Франскевич, І. І. Гринюк, С. В. Прилуцька, О. П. Матишевська

Київський національний університет імені Тараса Шевченка, Україна;
e-mail: dashaqq@gmail.com

Припускають, що у злоякісно трансформованих клітинах Са2+-регуляторна система є ремодульованою, зокрема, внаслідок послаблення входу катіона крізь плазматичну мембрану за ємнісним механізмом (SOCE), що дозволяє утримувати концентрацію цитозольного Са2+ на помірно підвищеному рівні та уникати апоптозу. У роботі з використанням зонда Indo 1AM оцінено відносні величини Ca2+-пулу ендоплазматичного ретикулума та ємнісного входу Ca2+ у лейкемічних клітинах дикого типу (L1210) та резистентних до цисплатину (L1210R) у контролі,  за дії цисплатину (1 мкг/мл) або фотозбудженого С60 (10-5 М) окремо, чи за їх комбінації. Показано, що величина SOCE в резистентних до цисплатину клітинах L1210R була нижчою, ніж у клітинах L1210. За дії цис­платину величина тапсигаргін (TG)-чутливого Ca2+ пулу ЕПР у клітинах L1210 знижувалась без підвищення SOCE, тоді як у клітинах L1210R не було відмічено змін. Фотозбудження акумульованого фулерену С60 у видимому діапазоні спектра (410–700 нм) спричиняло посилення SOCE не тільки в чутливих, але й в резистентних до дії цисплатину клітинах. У резистентних клітинах L1210R за дії фотозбу­дженого фулерену С60 цисплатин впливав на Ca2+ гомеостаз: величина SOCE зростала більше, ніж за дії тільки фотозбудженого С60. Одержані дані вказують на вплив фотозбу­дженого С60 не тільки на Ca2+-регуляторну систему, але й на компоненти систем, що контролюють надходження цис­платину в резистентних до препарату злоякісно трансформованих клітинах.

Індукція ємнісного входу Са(2+) і вивільнення цитохрому с в клітинах Jurkat за дії фотозбудженого фулерену С(60)

С. М. Гребіник1, К. О. Паливода2, С. В. Прилуцька1, І. І. Гринюк1,
А. А. Самойленко2, Л. Б. Дробот2, О. П. Матишевська1

1Київський національний університет імені Тараса Шевченка, Україна;
2Інститут біохімії ім. О. В. Палладіна НАН України, Київ;
e-mail: matysh@yahoo.com

З використанням флуоресцентного зонда Індо-1 оцінено відносну величину кальцієвого пулу ЕПР, ємнісного входу Са2+ і ступеня наповнення кальцієвого пулу мітохондрій в тимоцитах і клітинах Jurkat. Показано, що ємнісний вхід катіона в тимоцити значно нижчий, ніж у клітини Jurkat. Відмічено значне посилення ємнісного входу Са2+ у клітини Jurkat, преінкубовані з 10-5 M C60 і піддані дії видимого опромінення. Через 1–3 години після його впливу було зафіксовано зниження FCCP-індукованого вивільнення Ca2+ з мітохондрій і підвищення вмісту цитохрому с у цитоплазмі клітин Jurkat. Припускається, що ремодуляція системи Са2+-сигналювання може бути залучена до початкових етапів індукованого фотозбудженим фулереном С60 апоптозу в клітинах Jurkat.

Генерація активних форм кисню в тимоцитах щурів за дії пероксиду водню та фулерену С(60)

С. М. Гребіник, І. І. Гринюк, С. В. Прилуцька, О. П. Матишевська

Київський національний університет імені Тараса Шевченка, Україна;
e-mail: grebnik_z@yahoo.com

З використанням флуоресцентного зонда DCF оцінено динаміку продукування активних форм кисню (АФК) у тимоцитах упродовж 50 хв після дії 0,1 та 0,5 мМ Н2О2. Встановлено залежне від концентрації оксиданту посилення продукування АФК, яке супроводжується підвищенням супероксиддисмутазної та глутатіонпероксидазної активності тимоцитів та зниженням їх життєздатності.
Передінкубація клітин з 10-5 фулереном С60 приводила не лише до зниження продукування АФК у початковий період після дії Н2О2, але й до підвищення життєздатності тимоцитів у віддаленіший термін часу після дії оксиданту. Одержані дані свідчать про здатність фулерену С60 запобігати розвитку окисного стресу в тимоцитах.

Модуляція індукованого цисплатином продукування активних форм кисню фулереном С(60) у нормальних та трансформованих лімфоїдних клітинах

Д. В. Франскевич, І. І. Гринюк, С. В. Прилуцька, О. П. Матишевська

Київський національний університет імені Тараса Шевченка, Україна;
е-mail: dashaqq@gmail.com

Досліджено ранні прояви дії протипухлинного препарату цисплатину та його комбінованої дії із представником вуглецевих наноструктур фулереном С60 на нормальні (тимоцити щура Wistar) та трансформовані (лімфоїдна лейкемія миші L1210) клітини. З використанням флуоресцентних зондів DCFH-DA та TMRE показано, що цисплатин (1 мкг/мл) спричиняв продукування активних форм кисню (АФК) та знижував величину мітохондріального потенціалу в клітинах обох типів. Комбінована обробка цисплатином (1 мкг/мл) та С60 (7,2 мкг/мл) призводила до різноспрямованої модуляції продукування АФК у тимоцитах та клітинах L1210. Індуковане цис­платином продукування АФК у клітинах L1210 посилювалось, тоді як у тимоцитах зменшувалось. Припускається, що виявлені різноспрямовані ефекти пов’язані з відмінностями в акумуляції та локалізації фулерена С60 у нормальних та злоякісних клітинах.

Фулерен C(60) запобігає генотоксичній дії доксорубіцину на лімфоцити людини in vitro

К. С. Афанасьєва1, С. В. Прилуцька1, О. В. Лозовик1, К. І. Богуцька1,
А. В. Сиволоб1, Ю. І. Прилуцький1, У. Ріттер2, П. Шарфф2

1Київський національний університет імені Тараса Шевченка, Україна;
е-mail: prylut@ukr.net;
2Технічний університет Ілменау, Інститут хімії і біотехнології, Ілменау, ФРН

Самоорганізація фулерену C60, доксо­рубіцину та їх суміші, осаджених із водних розчинів, була досліджена з використанням методу атомно-силової мікроскопії. Результати передбачають комплексоутворення між цими двома препаратами. Генотоксичність комплексу фулерену C60 із доксорубіцином (С60+Докс) оцінювали in vitro на лімфоцитах людини за допомогою методу ДНК-комет. Одержані результати демонструють, що фулерен C60 запобігає токсичній дії Докс на нормальні клітини і, відповідно, комплекс С60+Докс може бути використаний у біомедичних цілях.